作者:李戈辉,吴玮,邸铭洋,王长城,杨桂朋,丁海兵
摘要:聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)是分离、纯化蛋白质的常用技术。传统的基于Laemmli方法(Laemmli胶)制备的十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺电泳胶(SDS-PAGE)能够基于蛋白质分子量的不同分离蛋白质,蛋白质分离性能良好,但存在电泳时间长、保质期短等缺点,其应用有一定的局限性。本研究用三异丙醇胺、三乙醇胺等成分代替Laemmli胶中的三羟甲基氨基甲烷的盐酸盐(Tris-HCl)作为缓冲物质,获得I型和II型两种新型电泳胶。电泳实验的结果表明这两种新型电泳胶保持了Laemmli电泳胶优良的蛋白质分离性能,并能够耐受更高的电压,具有更快的电泳速度。加速寿命实验的结果表明这两种新型电泳胶具有比Laemmli胶和现在流行的商业预制胶更长的保质期。新型I电泳胶比新型II电泳胶分离性能更好,保质期更长,在37℃可储存15天,相当于在4℃的保质期15个月。
发文机构:中国海洋大学海洋化学理论与工程技术教育部重点实验室 中国海洋大学化学化工学院 迪申生物技术(上海有限公司)
关键词:聚丙烯酰胺凝胶电泳蛋白质分离三异丙醇胺三乙醇胺电泳胶保质期polyacrylamide gel electrophoresisprotein separationtriisopropanol aminetriethanolamineshelf life of electrophoresis gel
分类号: Q-331[生物学—生物化学]Q503