作者:魏帅,刘媛,刘蒙娜,孙钦秀,刘书成,吉宏武,郝记明,邓楚津,毛伟杰
摘要:【目的】从凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)中分离纯化多酚氧化酶(Polyphenol Oxidase,PPO),进行质谱鉴定,分析其生物学信息。【方法】采用硫酸铵沉淀结合柱层析法从虾头胸部中提取纯化PPO,电泳法确定其分子质量,采用液相质谱联用法分析氨基酸序列结构,根据分析结果,同源建模并进行评估。【结果与结论】获得了高纯度的PPO,其纯化倍数为65.7,酶比活力达650.1 U/mg蛋白,得率为29.5%。PPO分子质量约为72 ku。经质谱检测分析和basic local alignment search tool(BLAST)序列比对,纯化蛋白与凡纳滨对虾酚氧化酶原的氨基酸序列相似性为65%,匹配度分值为11 321,确认为PPO。PPO是一种亲水性大于疏水性的两性蛋白,二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主,建立的PPO三维结构模型可靠性较高。
发文机构:广东海洋大学食品科技学院 海洋食品精深加工关键技术省部共建协同创新中心 南方海洋科学与工程广东省实验室(湛江)
关键词:凡纳滨对虾多酚氧化酶质谱鉴定生物信息学Litopenaeus vannameiPPOmass spectrometryidentificationbioinformatics
分类号: Q78[生物学—分子生物学]Q959.223[生物学—动物学]