基于PCR和TOF-MS海洋源产脂肽芽孢杆菌筛选

作者：邓旗,花梅芳,杨秀文,孙力军,蒲月华,王雅玲,廖建萌,刘颖,房志家

摘要：【目的】准确高效分离红树林等海洋环境中产脂肽芽孢杆菌。【方法】将前期从红树林环境筛出具有抗菌活性的12株芽孢菌株作为研究菌株,采用溶血活性及排油作用对其中的可能产脂肽菌株进行初步筛选,并基于脂肽合成酶基因PCR扩增法对脂肽合成酶基因携带菌复筛,采用飞行时间质谱(TOF-MS)对所产脂肽进行鉴定。【结果】初步发现6株芽孢杆菌具有溶血活性,其中HY-5、HY-4和HN-9这3株具有排油能力,油层透明圈的直径分别为45、32和3 mm。PCR扩增检测到HY-5含有iturin、surfactin和bacillomycin D合成酶基因,HY-4含有iturin、surfactin合成酶基因,HN-9含有iturin合成酶基因。TOF-MS检测到HY-5和HY-4的发酵液含surfactin、iturin和bacillomycin 3种脂肽,HN-9的发酵液只含iturin。【结论】基于PCR与TOF-MS为核心的级联技术,建立一种海洋源脂肽产生菌快速筛选以及脂肽谱快速鉴定的方法,解决海洋源芽孢杆菌在常规培养基难合成脂肽造成的漏筛情况。

发文机构：广东海洋大学食品科技学院//广东省水产品加工与安全重点实验室//广东省海洋生物制品工程实验室//广东省海洋食品工程技术研究中心//水产品深加工广东普通高等学校重点实验室 海洋食品精深加工关键技术省部共建协同创新中心//大连工业大学 广东省特种设备检测研究院湛江检测院 湛江市食品药品检验所

关键词：海洋脂肽PCR扩增芽孢杆菌质谱marinelipopeptidePCR amplificationbacillusmass spectrum

分类号： S9[农业科学—水产科学]TS201[轻工技术与工程—食品科学]