尼罗罗非鱼Galectin-4基因的原核表达及诱导条件优化

作者：张志强,刘鑫潮,牛金中,黄瑜,王蓓,简纪常

摘要：【目的】研究尼罗罗非鱼(Oreochromisniloticus)Galectin-4基因(记作OnGal-4)的原核表达,为大量获取尼罗罗非鱼Galectin-4蛋白(OnGal-4)和后续功能研究奠定基础。【方法】根据NCBI上公布的尼罗罗非鱼Galectin-4基因序列(Genbank:XM-019345120)设计引物,构建原核表达载体,诱导Galectin-4重组蛋白(r OnGal-4)在BL21原核表达系统中表达,并优化其诱导条件。【结果与结论】成功扩增出OnGal-4基因,并构建原核表达载体pGEX-4T-On Gal-4。rOnGal-4最佳诱导条件是温度28℃,IPTG浓度0.4 mmol/L,诱导时间4 h。在此条件下,rOnGal-4在可溶性蛋白中大量表达。Western-blot结果显示,rOnGal-4可与抗GST标签的单克隆抗体发生特异性反应。

发文机构：广东海洋大学水产学院//广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室//广东省水产经济动物病害控制重点实验室

关键词：尼罗罗非鱼Galectin-4基因克隆原核表达条件优化Oreochromis niloticusGalectin-4gene cloneprokaryotic expressioncondition optimization

分类号： Q78[生物学—分子生物学]Q959.223.63[生物学—动物学]